稿件标题: | β 内酰胺酶E166C突变型的原核表达、 纯化及鉴定 |
稿件作者: | 肖美芳,王昌富,周义正,邱晓燕 |
栏目名称: | 军事医学与卫生装备 |
关键词: | β 内酰胺酶E166C突变体;PCR 介导的定点突变;蛋白纯化及鉴定 |
文章摘要: | 目的〖HTSS〗〓本研究旨在构建β 内酰胺酶E166C突变体并于大肠杆菌中原核表达,纯化及鉴定该蛋白。〖HTH〗方法〓〖HTSS〗利用体外PCR扩增获得β 内酰胺酶penP突变质粒并通过DNA测序鉴定,将重组质粒转化至BL21(DE3) 中,以IPTG 诱导蛋白表达。菌液超声裂解后首先以镍柱纯化融合蛋白,蛋白水解酶 HRV3C 除去融合标签,然后用凝胶过滤层析色谱进一步纯化得到目标蛋白,最后应用SDS PAGE和电喷雾质谱法鉴定纯化的目标蛋白。〖HTH〗结果〓〖HTSS〗成功构建了β 内酰胺酶penP E |
引用本文格式: | 肖美芳,王昌富,周义正,等. β 内酰胺酶E166C突变型的原核表达、纯化及鉴定[J].四川兵工学报,2015(6):153-156. XIAO Mei fang, WANG Chang fu, ZHOU Yi zheng, et al. Protein Expression, Purification and Identification of β Lactamase PenP E166C Wildtype and Mutants[J].Journal of Sichuan Ordnance,2015(6):153-156. |
刊期名称: | 2015年06期 |
出版时间: | 2015年6月 |
上线时间: | 2015年6月28日 |
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